Едкий натр (химически чистый) . 21,6 г

Уксусная кислота (химически чистая) .............. 27,0 »

Дистиллированная вода до.....1000,0 см3

Приготовление краски:

Исходной краски Гимза …………10см3

Дистиллигрованной воды ……….40 »

Буферного раствора до ………….100 »

Свежие мазки окрашивают в продолжение 1 часа, старые препараты -- дольше (до 2 часов). Краска с мазка смывается буферным раствором и затем высу-шивается, как обычно.

При окрашивании препарат нужно класть на рас-твор краски мазком вниз.

Белые кровяные тельца - лейкоциты.

Лейкоциты (белые кровяные тельца) различаются между собой как морфологически, так и по биологи-ческой роли в организме. Будучи полноценными клетками, имеющими протоплазму и ядро, лейкоци-ты обладают отчётливо выраженной способностью к активному способу питания путём захвата и внут-риклеточного переваривания попадающих в кровь органических тел. Эта способность приобретает первостепенное биологическое значение в случае проникновения в организм патогенных мик-робов: пожирание их лейкоцитами -- фагоци-тоз (Мечников, 1882--1893) -- составляет важней-шее средство борьбы организма с инфекцией.

Наряду с фагоцитозом, весьма важное значение имеет образование лейкоцитами иммун-ных тел. У многих низших, а весьма возможно и высших животных особые лейкоциты выполняют также функцию переноса питательных веществ (трефоциты). Наконец, отдель-ные виды лейкоцитов (эозинофилы высших животных) способны обезвреживать токсины. Крупную роль лейкоциты играют в обмене веществ и в образовании так называемых трефонов -- стимуляторов клеточ-ного роста, особенно в условиях регенерации тканей.

Структурные различия отдельных видов бе-лых кровяных телец изучены, начиная с работ П. Эрлиха (Р. Ehrlich, 1877--1898 гг.), достаточно хорошо. Значительно менее изучены их функцио-нальные особенности, их целлюлярная физиология. Несмотря на огромное количество работ, онтогенез белой крови полностью ещё не выяснен. Наконец, сложная нейро-гуморальная регуляция сосудистой и внесосудистой белой крови исследована в чрезвы-чайно малой степени. Мало данных имеется даже о длительности жизни белых кровяных телец. По не-которым авторам, она весьма невелика (3--4 дня).

Основным принципом современной классификации лейкоцитов является морфологический.

У различных сельскохозяйственных и лаборатор-ных животных один и тот же тип лейкоцитов (особен-но эозинофилы и нейтрофилы, или гетерофилы) имеет специфические отличия в структуре. Однако в главном структура каждого типа лейкоцитов у всех сельскохозяйственных животных весьма близка и поэтому целесообразно вначале дать их общее описание, без видовой дифференциации.

По структуре ядро эозинофилов близко к ядру нейтрофилов, но несколько бледнее и выглядит грубее, так как чередующиеся светлые (оксихроматин) и тёмные (базихроматин) участки ядра эозинофилов крупнее, чем у нейтрофилов.

По мере созревания клетки ядро эозинофильных лейкоцитов изменяется в том же направлении, что и нейтрофильных, т. е. ядерный жгут скручивается и утончается, сперва равномерно (юные и палочкоядерные формы),а затем отдельные участки (сегменты) почти перестают утончаться и остаются сравнитель-но толстыми, а находящиеся между ними -- превра-щаются в "тончайшие нити (сегментоядерные фор-мы). Однако сегментация ядра эозинофилов выражена не очень резко. Очень частой, типичной формой яв-ляется 2-дольчатая форма ядра, причём дольки напо-минают формирующиеся и только что отрывающие-ся капли, обращенные друг к другу узкими концами, соединёнными перемычкой, или две груши, соединён-ные плодоножками. У овец полиморфность ядра эози-нофилов выражена сильнее. Хотя при некоторых болезнях можно наблюдать в крови изменение отношения между возрастными формами эозинофилов в сторону увеличения более молодых (палочкоядерных, юных и даже миэлоцитов. -- «сдвиг ядра влево»), но, ввиду относительной малочисленности (3--10%) эозинофилов, учёт ядер-ного сдвига в лейкоцитарной формуле не произво-дится.

Эозинофилы имеют очень большое клиническое значение. Эозинофилы или исчезают из крови (анэо-винофилия), или уменьшаются в количестве (гипоэозинофилия), или, наконец, количество их резко нара-стает (гиперэозинофилия, или просто эозинофилия). Большинство инфекционных заболеваний в первом своём периоде связано с резким уменьшением коли-чества эозинофилов (гипоэозинофилия). Возврат эозинофилов в кровяное русло считают признаком ос-лабления болезни. При роже свиней и при многих инвазиях (особенно гельминтозах) наблюдается рез-кое увеличение эозинофилов (эозинофилия), доходя-щее у крупного рогатого скота до 40%. Эозинофилия встречается и при аллергических реакциях, причём здесь её связывают, так же как и при гельминтозах, с раздражением системы блуждающего нерва.

Функции эозинофилов недостаточно изучены.

Вероятна способность их зернистости к обезвре-живанию токсинов, а также участие зёрен в окисли-тельных процессах. Эозинофилы скопляются в ме-стах тканевой регенерации. Характерна локальная эовинофилия кишечника.

III. Специальные зернистые лейкоциты, или нейтрофилы

Нейтрофилы (специальные зернистые лейкоциты, гетерофилы, псевдоэозинофилы или амфиоксифилы некоторых животных) имеют очень важное значение для клиники и физиологии.

Клетки нейтрофилов округлые, диаметром от 7,0 до 15,0 µ. В цитоплазме обильная, очень мелкая, нейтрофильная зернистость. Я д р о, по мере развития клетки, постепенно сегментируется. Зернистость ясно заметна даже в свежей неокрашенной крови. Эти при жизни клетки серебристо блестящие зёрнышки густо выполняют эндоплазму, передвигаясь с нею при амебоидных движениях клетки. Экто-плазма представляет собой тонкий гомогенный периферический слой, свободный от гранул. У не-которых животных (мыши, крысы и кошки) эерни-стость выражена очень слабо, но, однако, вопреки отрицанию Максимова, несомненно есть.

Цитоплазма оксифильна, окрашивается в бледнорозовый цвет, иногда почти бесцветна. Изред-ка в цитоплазме нейтрофилов встречаются неболь-шие участки, сохранившие базофилию, характерную для материнской клетки. Такие ясноголубые пятна получили название телец Деле (Dohle).

Окраска зернистости специальных гранулоцитов несколько различна у разных видов животных. По-этому в последнее время для нейтрофилов предложе-но новое, удачное наименование -- гетерофилы.

У обезьяны, собаки, кошки и свиньи зерни-стость имеет сродство к нейтральным краскам и при комбинациях красок по Романовскому окраши-вается в розово-фиолетовый цвет. У большинства же остальных млекопитающих зернистость амфофильна, т. е. красится как кислыми, так и основными крас-ками. У коровы, овцы, лошади и морской свинки (по Максимову) эти зёрна амфооксифильны, т. е. имеют большее сродство к кислым краскам; у кроли-ка они окрашиваются эозином в яркокрасный цвет и поэтому называются псевдоэозинофилами.

У неко-торых животных гранулы амфобазофильны. Зерни-стость псевдоэозинофилов кур и других домашних птиц окрашивается в яркокрасный цвет,весьма круп-на и в большинстве случаев (особенно у зрелых форм) имеет палочковидную и даже веретенообразную, с заострёнными концами, форму. У более молодых форм зёрна округлы (Лебедев). Ряд авторов (Букраба, Я. Соловей) считает, что у кур нет вообще псевдоэозинофилов, а только эозинофилы. Но большинство исследователей диференцирует эозинофилов от псев-доэозинофилов, и морфологически и функционально, сближая последних со специальными гранулоцитами (Максимов, Рухлядев, Клинебергер и Карл, Лебе-дев). Особенно тщательное исследование разницы между эозинофильной и псевдоэозинофильной зер-нистостью произвёл Лебедев (1940 г.). Он устано-вил, что при суправитальной окраске бриллианткрезиловая голубая окрашивает гранулы эозинофилов в голубовато-розовый цвет, а псевдоэозинофилов -- в зеленовато-синий. Оксидазо- и пероксидазо-положительными оказались лишь эозинофилы. Окраска на липоиды по Зерту (Sehrt) дала положительный результат только с зернистостью эозинофилов. При обработке окрашенных препаратов смесью уксусной кислоты и спирта, зёрна эозинофилов сохраняют свою окраску, а верна псевдоэозинофилов обесцве-чиваются. Наконец, сдвиг ядра псевдоэозинофилов у кур был идентичен с закономерностями сдвига ядра нейтрофилов при ряде патологических состоя-ний у других животных. Следует, однако, отметить, что ранние стадии развития псевдоэозинофилов и эозинофилов, окрашенные растворами Гимза или по Паппенгейму, различать крайне трудно.

Разделение лейкоцитов на типы можно представить так:

Следует иметь в виду, что так называемая «структура» ядер является, при обычных способах фикса-ции, в том числе и фиксации метиловым спиртом, в значительной степени результатом коллоидальной флокуляции веществ ядра. В зависимости от при-меняемых фиксаторов, эта структура существенно из-меняется. На самом же деле, как показал П. В. Ма-каров (1948 г.), покоящееся нативное ядро -- за исключением ядрышка -- оптически пусто, без мик-роструктур. В период кариокинетического деления в нём возникают временные образования -- хромо-сомы.

Поэтому в дальнейшем описании под структурой ядра следует понимать возникающие в ядре при взаимодействии с фиксирующими и красящими ве-ществами варьирующие образования -- коагуляты. В ядрах различных клеток, в зависимости от специфи-ческих коллоидально химических различий их ядер-ной плазмы (кариоплазмы), эти коагуляты имеют не-которые морфологические особенности, которые и дают возможность различать между собою виды клеток.

А. ГРАНУЛОЦИТЫ

I. Базофилы

Базофильные гранулоциты, или тучные клетки, обычно круглой или округло-овальной формы, диаметром 8--15 µ. (у лошадей и коров несколько более крупные). Сама цитоплазма слабооксифильна и окрашивается в бледный, розовато-фиолетовый или, иногда. сыровато-голубой цвет, но находящиеся в ней крупные округлые зёрна (гранулы) резко базофилъной природы и окрашиваются метахроматически в тёмный красно-фиолетовый или ультрамариново-фиолетовый цвет (цвет мальвы -- по Крюкову).. Зёр-на легко растворяются в воде и потому в препаратах, фиксированных плохо обезвоженным метиловым спиртом, часто на место верен в цитоплазме обра-зуются белые «окошечки». При фиксации абсолютным метиловым спиртом зёрна сохраняются хорошо. Расположение гранул в цитоплазме неравномер-ное, рыхлое. Часто они закрывают отдельные участки ядра. По своей химической природе базофильные зёр-на являются белками, близкими к гликопротеидам.

Ядро базофилов -- неясной структуры, неправильно лопастное или округлое, окрашивает-ся в фиолетово-розовый цвет. В ядре расплывчато чередуются более светлые поля оксихроматина с темноокрашенными базихроматиновыми полями.

В базофилах чрезвычайно трудно различить ста-дии миэлоцита -- юную, палочкоядерную и сегментоядерную. Вообще сегментированность ядра выра-жена слабо. Практического значения, для подсчёта лейкоцитарной формулы, дифференциация базофилов по степени их зрелости не имеет, прежде всего, пото-му, что в крови млекопитающих их очень мало: от 0,1 до 1--2%, в среднем 0,5%. Кровь сельскохозяй-ственных птиц содержит 3--4% базофилов, а содержа-ние их в крови лягушек доходит до 23%.

Вообще, содержание базофилов очень высоко у амфибий, рептилий и у некоторых рыб.

Функциональное значение базофилов не выяснено. Повидимому, они играют некоторую роль в защите организма при парентеральном введении чуждых белков. Они способны фагоцитировать и содержать окислительные ферменты. Ряд учёных считает их трефоцитами («питающие клетки» Либмана). Такие клетки, переносящие питательные вещества, особен-но широко распространены у беспозвоночных, где они часто преобладают.

Клиническое значение базофилов невелико. Коли-чество их несколько возрастает при инъекции бел-ков, при некоторых авитаминозах (группы В) и гепатических циррозах.

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14