содержимом кишечника мало чем различаются у больных и здоровых телят [W. J.

Sojka, 1971].

В настоящее время для дифференциации энтеропатогенных штаммов и

непатогенных используют классический тест на изолированных петлях кишечника

кролика, поросенка, теленка [E. Salajka, 1980].

В последнее время опубликовано значительное количество работ, в которых

подробно дается характеристика купьтурально-морфологических и биохимических

свойств Е. coli выделенных от новорожденных телят, как больных, так и

здоровых [C. O. Jensen, 1897; О. С. Андреева, 1966; Е. П. Чиркова, 1968; А.

Ф. Пилуй, В. А. Ленькова, В. В. Медведьев, 1974; L. L. Myers, P. A. Guinee,

1976; Я. Е. Коляков, 1978; Л. К. Волынец, 1978; J. Hutchinson, 1979; М. А.

Сидоров, 1980; S. Tzipori, 1981; H. Brade, C. Galanos, 1983; И. И. Тарасов,

1984; Б. М. Анохин, 1985; А. В. Драгомир., Е. А. Драгомир., А. Ф. Карышева,

Ф. В. Спатарь,1985; И. И. Фельдман, 1985; В. Тилга, Н. Кампус, 1986; У.

Риихикоски, 1986; H. W. Ewing, 1986; М. А. Сидоров, 1987; Н. А. Соколова,

О. А. Полякова, Н. И. Евглевская, 1987; К. С. Ливанов, 1988; I. Blanco, E.

A. Gonzalez, S. Garcia, 1988; Н. Н. Жосан, 1989; А. А. Гутковский, 1989; B.

H. Janke, D. H. Francis, J. E. Collins, 1990; В. Г. Зароза, 1991; Ю. С.

Кабанков, С. Ф. Армашу, 1991; G. Galiero, M. Palladino, O. Lai, C. G.

Goffredi, 1995; А. В. Куликовский, А. Н. Панин, В. В. Соснина, 1997].

Согласно последним международным классификациям кишечных бактерий (9-ое

издание определителя бактерий Берги) род Escherichia представлен одним

видом Escherichia coli, который в свою очередь делится на серо-

ферментативные типы.

Е. coli представляет собой бактерию или кокобактерию размером 1-4

мкм/0,4-0,6 мкм. Под влиянием внешних факторов эшерихии трансформируются в

нитевидные формы длиной до 8-10 мкм. Спор не образуют. Перитрихи, но

некоторые штаммы не имеют жгутиков (атрихи). Под воздействием антибиотиков

и других факторов образуются гранулярные формы (L-форма), представленные

сферическими элементами различной величины (5-20 мкм). Большинство

серотипов, изолированных от здоровых животных не образуют капсулу.

Изолированные серотипы от больных животных могут быть как

капсулообразующими (серотипы 08, 09 и 0101), так и не образующими капсулу.

Красятся всеми анилиновыми красками. Грам-негативные.

Е. coli обладают ресничками (пили), которые представляют рецепторы,

посредством которых происходит абсорбция на бактериальной клетке РНК-

содержащих фагов, а также осуществляется проникновение РНК фага в микробную

клетку. В процессе конъюгации через реснички (пили), выполняющие роль

коньюгационного мостика (канала) происходит передача ДНК от клетки донора к

клетке реципиенту. Фимбрии (реснички, пили) обладают адгезивными свойствами

с помощью которых эшерихии прикрепляются на эпителиальных клетках

пищеварительного тракта.

Способность Е. coli образовывать фимбриальные адгезины определяют в

капельной РА с моноспецифическими антиадгезивными сыворотками К99, F41,

Аtt25, 987Р, К88ав, К88ас, К88аd [О.А. Полякова, Н. И. Евглевская, Н. А.

Соколова, 1986; Ю. А. Маллахов, О. А. Тугаринов, М. К. Пирожков, Т. И.

Исхакова, 1993].

Е. coli - аэроб или факультативный анаэроб. Оптимальная температура

роста 37,5° С, рост и размножение бактерий может происходить в пределах 15-

45° С, оптимум рН 7,0, но культивировать возможно и при значительных

изменениях рН среды.

Культивируют, как на обычных (МПБ, МПА), так и на дифференцнально-

днагностических средах (Эндо, Левина). В МПБ рост эшерихий характеризуется

равномерным помутнением среды без осадка или с образованием незначительного

осадка легко разбивающегося при встряхивании. В старых культурах образуется

иногда пристеночное кольцо и очень редко пленка. Форму «R» бактерий

продуцируют культуры образующие, осадок, а МПБ остается почти прозрачным.

На МПА форма «S» бактерий образуют округлые колонии, слегка выпуклые,

непрозрачные с ровными краями. Форма «R» представлена сухими колониями,

сплющенными, плотно прилегающими к среде с неровными краями. Размер колоний

варьирует в пределах 2-10 мм.

На среде Эндо кишечная палочка растет в виде малиново-красных колоний с

металлическим блеском или без него, а на среде Левина (агар с эозином и

метиленовой синькой) в виде темно-фиолетовых или черных колоний.

Кишечная палочка не требовательна к питательной среде и способна

размножаться даже в изотоническом растворе хлорида натрия [Я. Е. Коляков,

С. С. Гительсон, Л. С. Каврук, 1990].

1.1.3. Биохимические свойства. Одним из ведущих дифференциальных

признаков кишечной палочки, отличающих ее от бактерий других родов

семейства Enterobacteracea является сбраживание лактозы с образованием

кислота и газа [И. В. Голубева, 1985].

Кишечная палочка способна ферментировать многие сахара и многоатомные

спирты, глюкозу, маннит, дульцит, сахарозу, арабинозу и др., но, как

правило, не изменяет адонита и инозита. При сбраживании углеводов

образуется пируват, превращающийся в молочную, уксусную и муравьиную

кислоты. Глюкоза, лактоза, маннит сбраживаются с образованием кислоты и

газа. Сахароза и дульцит ферментируются непостоянно.

Кишечная палочка не усваивает цитраты, не разжижает желатину, выделяет

индол и не образует сероводород, дает положительную реакцию с метилротом и

отрицательную Фогес-Проскауэра (не образует ацетилметилкарбинол),

редуцирует нитраты в нитриты, непостоянно декарбоксилирует лизин и орнитин.

Она не обладает фенилаланиндезаминазой и цитохромоксидазой, являющейся

окислительным ферментом. Не растет на средах с цианистым калием [H. Fey,

1972; А. А. Гутковский, Г. Л. Дворкин, 1989; В. Г. Зароза, 1991; Ю. С.

Кабанков, С. Ф. Армашу, 1991].

1.1.4. Антигенная структура. Дифференциация патогенных Е. coli от

непатогенных стало возможным благодаря детальному изучению антигенной

структуры бактерий рода Escherihia [Th. Smith, M. L. Orcutt, 1925; H.

Knipschildt, 1945; F. Kaufman, 1966; H. Fey, 1972; G. Orskov, F. Orskov,

1984; А. А. Гутковский, Г. Л. Дворкин, 1989; Ю. С. Кабанков, С. Ф. Армашу,

1991].

В 1948 году была опубликована первая классификация Кауфмана-Книпшильдта-

Вэлна, которая послужила основанием к международной классификации. [H. Fey,

1972].

Е. coli имеет сложную антигенную структуру. Различают соматический О-

антиген, поверхностный (оболочечный) К-антиген и жгутиковый Н-антиген [H.

Knipschildt, 1945; F. Kaufman, 1966; H. Fey, 1972; G. Orskov, F. Orskov,

1984].

В настоящее время по О-антигену эшерихии подразделяются на 180

серогрупп, по К-антигену на 104 и по Н-антигену на 56 серогрупп.

Установлено 18 фимбриальных адгезинов (пили-антигены) [В.Г.Зароза, 1988,

1991].

Соматический О-антиген Е. coli термостабильный, резистентный к

нагреванию при 100° С в течении 2,5 ч. Он представляет собой

полисахариднопротеинолипидный комплекс.

К-антиген имеет полисахаридную природу и состоит из трех компонентов,

обозначенных буквами L, В, А. Для типизации культуры по О-антигену ее

прогревают при температуре от 100 до 121°С. L- и В-антигены обладают

сходной термостабильностью. Антигенная способность штамма, обладающего В-

антигеном не полностью разрушается при нагревании при 100° С в течение 2,5

ч. Более строгая дифференцнация между L- и В-антигенами происходит, когда

культуру нагревают при 121°С. А-антиген сохраняет агглютинабильные и

антигенные свойства после нагревания культуры при 100° С, но эти свойства

утрачиваются при 121° С, через 2,5 ч. [Я. Е. Коляков, С. С. Гительсон, Л.

С. Каврук, 1970; H. Fey, 1972; А. А. Гутковский, Г. Л. Дворкин, 1989; В. Г.

Зароза, 1991]

Штамм Е. coli может обладать более чем одним типом К-антигена [G.

Orskov, F. Orskov, 1984].

Жгутиковый Н-антиген термолабильный, обладает антигенными и

агглютиногенными свойствами при нагревании до 60°С, эти свойства

утрачиваются при 100° С. Химический состав антигена-Н белковой природы [Th.

Smith, M. L. Orcutt, 1925].

Адгезивные антигены Е. coli имеют первостепенное, значение, поскольку

они позволяют микроорганизмам конкурировать с бактериями коменсалами при

паразитировании в организме животных.

Известно 7 типов специфических адгезивных антигенов: К99, К88, 987Р,

СFА1, СFА2 и F7, Аtt25 [В. Г. Зароза, 1988; А. Н. Головко, 1997].

Адгезивный антиген К99 впервые описан в 1975 г. он характерен для

кишечных палочек, энтеропатогенных для телят и ягнят, по некоторым

сообщениям и для поросят, жеребят, козлят [F. Orskov, G. Orskov, H. W.

Smith, W. J. Sojka, 1975; S. Tzipori, 1981].

В адгезивном антигене К99 в зависимости от иммунофоретической активности

его фракций различают анионный и катионный компоненты. Первый содержится

только в серотипах Е. coli О9, О101, а второй в серотипах Е. coli О8, О9,

О20, О64, О101. Серотипы Е. coli с анионным компонентом вызывает

агглютинацию эритроцитов овец, морских свинок и лошадей, а с катионным

компонентом только эритроцитов лошадей.

При заболевании телят диареей Е. coli К99 обычно заселяют медиальный и

каудальный сегменты тонкого кишечника. Энтеротоксигенные Е. coli с этим

антигеном обычно вызывают диарею у 1-2-дневных телят и 1-4-дневных ягнят

[H. W. Moon, S. C. Whipp, S. M. Skartvedt, 1976].

Адгезивный антиген К88 впервые описан в 1961г. По иммунофоретической

подвижности адгезивный антиген К88 имеет три варианта: К88ав, К88ас и

К88ад. [C. J. Murray, 1987].

Е. coli с адгезивным антигеном К88 вызывает в 71% случаев диарею у

новорожденных поросят. [J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Адгезивные антигены 987Р и F41 впервые описаны в 1977г. и в настоящее

время признаны энтеротоксигенными для поросят [B. Nagy, Gy. Nagy, 1982].

Характерная особенность культур Е. coli с адгезивпым антигеном 987Р -

отсутствие способности агглютинировать эритроциты. Этот антиген не

сочетается с К88, обладает более выраженными, чем К88 колонизирующими и

адгезивными свойствами и встречается иногда у телят. Адгезивный антиген

F41 в отдельных случаях у Е. coli может сочетаться с адгезивным антигеном

К99 [J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Адгезивные антигены СFА1, СFА2, и F7 впервые описаны в 1975 (СFА1, СFА2)

и в 1980 - F7 .Все эти антигены характерны для кишечных палочек,

энтеротоксигенных для человека. Данные типы адгезивных антигенов

термолабильны, обладают выраженной специфичностью, агглютинируют у человека

эритроциты крови группы А [S. Tzipori, 1981].

Адгезивные антигены Е. coli закодированы в плазмидах, которые относятся

к молекулам ДНК (независимо от хромосомы бактериальной клетки) и обладают

способностью к репликации. При скрещивании бактерий-доноров с другими

реципиентами плазмиды легко им передаются т.е. обладают трансмиссивностью

[М. А. Сидоров, М. А. Соколова, 1982; J. A. Morris, W. J. Sojka, 1985].

Взаимосвязь адгезивных и соматических антигенов. При диареи телят

энтеротоксигенные Е. coli с адгезивным антигеном К99 в 47 % случаев

относятся к О-группе 101, а в остальных случаях к О-группам 64, 8, 9, 20.

При холероподобных заболеваниях детей у энтеротоксигенных Е. coli

адгезивный антиген СFА1 коррелирует с соматическим антигеном 78, а антиген

СFА2 с О-группами 6 и 8 [B. Nagy, Gy. Nagy, 1982]. При диареи поросят

энтеротоксигенные Е. coli с адгезивным антигенами К88, 987Р, К99

присутствуют у Е. coli О-групп 9, 20, 141, 101, 149, причем Е. coli О101

чаще всего синтезируют антиген К99 [M. Awad-Masalmeh, H. W. Moon, P. L.

Runnels, R. A. Schneider, 1982].

1.1.5. Токсины. Несмотря на многочисленные исследования в области

изучения биологии кишечной палочки, все еще недостаточно ясно, за счет

каких именно свойств патогенных серотипов Е. coli обусловливается их

энтеропатогенность и способность, в отличие от непатогенных кишечных

палочек, вызывать заболевания у новорожденных телят [Ю. П. Вертиев, 1987].

Поэтому изучение токсических компонентов Е. coli имеет большое значение

в расшифровке патогенности кишечной палочки.

Уже вскоре после открытия кишечной палочки отдельные исследователи

Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16