внутрішньоклітинного Р 53. В резистентних до цисплатина клітинах іноді

спостерігається гіперекспресія гена mdm 2 [87] а використання

антисмислових (проти mdm 2) нуклеотидів у такій системі призводить до

збільшення чутливості до лікарської терапії [88].

Таким чином, функція Р 53 може бути інактивована двома шляхами: мутаціями

безпосередньо гена р 53 а також підвищеним комплексоутворенням Р 53 з

MDM 2.

Але дані деяких досліджень заперечують, що мутації р 53 обов`язково

спричиняють розвиток лікарської резистентності. Feudis з співавторами показали,

наприклад, на 9 клітинних лініях раку яєчника з різним р 53- статусом,

що в цих клітинних лініях після обробки цисплатином рівень експерсії р 21

підвищується однаковo і немає різниці у чутливості до апоптозу, індукованого

дією препарата [89,90].

Однак відомо, що більш половини злоякісних новоутворень людини відрізняються

мутаціями р 53, i ця ознака є важливим показником чутливості пухлин до

хіміотерапії [91]. У клінічних дослідженнях показано, що рівень експресії р

53 у зразках біопсійного матеріала при раку шлунка та яєчників може бути

важливим прогностичним показником захворювання [92]. Досліджено, що Р

53-позитивний фенотип пухлин асоціюється з поганим прогнозом [93,94]. Це

пояснюється тим, що мутантна форма білка має подовшений час напівжиття і тому

легше виявляється імуногістохімічно.

Білки родини Bcl (Bcl-2, Bcl-Xl, Bcl-Xs, Bax та інші)

грають важливу роль у регуляції процесу апоптоза. Деякі з них (Bcl-Xl

, Bcl-2) гальмують розвиток апоптоза, тоді як інші (Bcl-Xs, Bax, Bak) – навпаки

є промоторами цього процесу. Відомо, що білки даної родини здатні

гетеродимеризуватись, утворюючи умовний “реостат”, який регулює функціональну

активність білків [95]. Досліджено, що білки Bcl-2 та Bcl-Xl

гіперекспресовані при багатьох неопластичних захворюваннях людини. Причому така

гіпрекспресія асоційована з резистентністю пухлинних клітин in vitro до

протипухлинних препаратів [96]. Така стійкість клітин пов`язана з порушенням

механізмів індукції апоптозу у відповідь на лікарську терапію. У дослідах з

використанням клітин траксфекованих генами bcl-2 чи bcl-xl

було показано, що трансфекти набувають резистентний фенотип до цілого ряду

лікарськиї препаратів включаючи цисплатин [97,98]. У таких модельних клітинах

була значно зменшена деградація ДНК після обробки цисплатином. Якщо порівнювати

внесок продуктів генів bcl-2 та bcl-xl у антиапоптозному

ефекті, то показано, що білок Bcl-Xl має більший вплив [99].

Після обробки цисплатином у чутливих клітинах, що входять в апоптоз, не

змінюється рівень експресії білків Bcl-2, Bcl-Xl та Bax (24kDa), але

підвищується рівень білків Bak та Bax (21 kDa), тобто білків-агоністів

апоптозау [100-102]. Відомо, що в деяких резистентних до цисплатина клітинних

лініях спостерігається знижений рівень експресії Bax [103], а трансфекція гена

bax спричиняє підвищення чутливості до хіміотерапії [104]. А от клітини з

підвищеною експресією Bak відрізняються більшою чутливістю до дії цисплатина

[105].

Відомо, що білок Bcl-2 часто гіперекспресований у пухлинах людини. Причиною

такої гіперекспресії вважають часті ділеції великих нетрансльованих

послідовностей з 3 та 5 – кінців гену bcl-2 (78-А). Дещо суперечливі

дані імуногістохімічних досліджень експресії білків родини Bcl у зразках

біопсійного матеріалу та прогнозування чутливості до лікарської терапії у

порівнянні з дослідженнями in vivo. Наприклад, одні дослідники

повідомляють, що Вcl-2-позитивні неоплазії мають слабку відповідь на

хіміотерапію та поганий прогноз [106,107], інші – навпаки, спостерігають, що

експресія Вcl-2 у пухлинах асоціюється з покращеним виживанням [108]. Експресія

Вax окремо не має ніякого прогностичного значення [109].

Роботи, зроблені з використанням резистентних до дії цисплатина лініях клітин

показали важливість онкогена fos в резистентності до цього препарату. В

резистентних лініях клітин спостерігали підвищений рівень експресії гена

fos. Були визначені дві важливі функції Fos-білка: транскрипційна активація

синтеза ДНК та участь у клітнинній проліферації. Fos-білок контролює клітинну

відповідь на пошкодження ДНК цисплатином через активацію генів топоізомерази І,

полімерази b та металотеонеіна [2].

Повідомляється про те, що гіперекспресія супресорного гена nm 23

супроводжується, як правило, збільшенням чутливості до дії цисплатина. Дані

результати отримано з досліджень in vitro на клітинних лініях карциноми

молочної залози людини MDA-MB-435, лінії карциноми яєчника OKAR-3 та лінії

меланоми К-1735-ТК, а також при дослідженні клінічного матеріалу пухлин

молочної залози. У всіх досліджуваних системах гіперекспресія nm 23 призвела

до формування у клітинах великої кількості міжланцюгових зшивок ДНК та

збільшення чутливості до цисплатина [110].

Цікавими є дані по переносу резисткнтного до цисплатина фенотипу при трансфекції

генів v-src. Непухлинні епітеліальні клітини людини HAG-1 після трансфекції

гену v-src набували неопластичного фенотипу та резистентності до

цисплатина. У трансформованих клітинах спостерігали значне зменьшення

формування міжланцюгових зшивок ДНК з їх послідовним швидким видаленням. Після

обробки даних клітин інгібіторами src-кіназ знижувався рівень резистентності до

цисплатина. Результати цієї роботи вказують на можливість участі продукту гена

v-src в індукції резитентності до цисплатина шляхом модуляції деяких шляхів

репарації ДНК [111].

Ампліфікація гена сорцина (кальцій-звязуючого білка з молекулярною масою 19-

22кД) в деяких модельних системах асоціювалася з резистентним фенотипом

[112]. Важко зараз сказати, чи є резистентність пов`язаною саме з сорцином чи

разом з геном сорцина у клітинах ампліфіковані і інші, більш важливі для

розвитку резистентності гени.

Таким чином резистентність до цисплатина має комплексний характер і пов`язана з

рядом особливостей клітин на рівні цитоплазматичної мемрани,

внутрішньоклітинних систем детоксикації, систем репарації та порушення

функціональної активності генів p 53, bcl-2, fos, mdm 2, nm23та інших

.

Список літератури

1. Чехун ВФ. Роль плазматичних мембран нормальних і

пухлинних клітин в механізмі реалізації цитотоксичних ефектів координаційних

сполук платини [Автореф дис ... докт мед наук]. Киев: ИЭПОР, 1994. 40 сс.

2. Scanlon KJ, Kashani-Sabet M, Tone T, Funato T. Cisplatin resistance in

human cancers. Pharmacol Ther 1991; 52:385-406.

3. Gately DP, S.B.Howell SB. Cellular accumulation of the anticancer agent

cisplatin. Br J Cancer 1993; 67:1171-6.

4. Ohmori T, Morikage T. The mechanism of the difference in cellular uptake

of platinum derivatives in non-small cell lung cancer cell line (PC-14) and

its cisplatin-resistant subline (PC-14/CDDP). Jpn J Cancer Res 1993; 84: 83-

92.

5. Scanlon KJ, Safistein RL, Thies H, Gross RB, Waxman S, Guttenplan JB.

Inhibition of amino acid transport by cis-diamminedichloroplatinum (II)

derivatives in L1210 murine leukemia cells. Cancer Res 1983; 43: 4211-5.

6. Andrews PA, Velury S, Mann SC, Howell SB. Cis-diamminedichloroplatinum II

accumulation in sensitive and resistant human ovarian carcinoma cells. Cancer

Res 1988; 48: 68-73.

7. Richon VM, Schulte N, Eastman A. Multiple mechanisms of resistance to

cis-diamminedichloroplatinum (II) in murine leukemia L1210 cells. Cancer Res

1987 47: 2056-61.

8. Zaman GJR, Lakelma J, Tellingen O, Beijnen J, Dekker H, Paulusma C,

Oude Elferink RPJ, Baas F, Borst P. Role of glutathione in the export of

compaunds from cells by the multidrug-resistance-associated protein. Proc

Natl Acad Sci USA 1995; 92:7690-4.

9. Muller V, Meijer C, Zaman GJR. Overexpression of the gene encoding the

multidrug resistance-assiciated protein results in increased ATP-dependent

glutathione S-conjugate transport. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91: 13033-7.

10. Ishikawa T, Ali-Osman F. Glutathione-associated cis-

diamminedichloroplatinum (II) metabolism and ATP-dependent efflux from

leukemia cells. J Biol Chem 1993; 268: 20116-25.

11. Laurent G, Erickson LC, Sharkey NA, Kohn KW. DNA cross-linking and

cytotoxicity induced by cis-diamminedichloroplatinum (II) in human normal

and tumor cell lines. Cancer Res 1981; 41: 3347-51.

12. Sorenson CM, Barry MA, Eastman A. Analysis of events associated with cell

cycle arrest at G2 phase and cell death induced by cisplatin. J Natl Cancer

Inst 1990; 82: 749-55.

13. Olivero OA, Chang PK, Lopez-larraza DM, Semino-Mora MC, Poirier MC.

Preferential formation and decreased removal of cisplatin-DNA adducts in

chinese hamster ovary cell mitochondrial DNA as compared to nuclear DNA.

Mutat Res 1997, 391(1-2): 79-86.

14. Giurgiovich AJ, Diwan BA, Olivero OA, Anderson LM, Rice JM, Poirier MC.

Elevated mitochondrial cisplatin-DNA adduct levels in rat tissues after

transplacental cisplatin exposure. Carcinogenesis 1997, 18(1): 93-6.

15. Gorczyca W, Gong I, Ardelt B, Traganos F, Darzynkiewicz Z. The cell cycle

related differences in susceptibility of HL-60 cells to apoptosis induced by

various antitumor agents. Cancer Res 1993, 53(13): 3186-92.

16. el Alaoui S, Lawry J, Griffin M. The cell cycle and induction of

apoptosis in a hamster fibrosarcoma cell line treated with anticancer drugs:

its importance to solid tumor chemotherapy. J Neurooncol 1997, 31(1-2): 195-

207.

17. Vaisman A, Varchenko M, Said I, Chaney SG. Cell cycle changes associated

with formation of Pt-DNA adducts in human ovarian carcinoma cells with

different cisplatin sensitivity. Cytometry 1997, 27(1): 54-64.

18. Nishio K, Saigo N. Effect of cisplatin on cell cycle regulators. Gan To

Kagaku Ryoho 1994, 21(3): 289-94.

19. Dimanche-Boitrel MT, Micheau O, Hamman A, Haugg M, Eymin B, Chauffert B,

Solary E. Contribution of the cyclin-dependent kinase inhibitor p27KIP1 to

the confluence-dependent resistance of HT 29 human colon carcinoma cells. Int

J Cancer 1998, 77(5): 796-802.

20. Gill JS, Mindebank AJ. Cisplatin-induced apoptosis in rat dorsal root

ganglion neurons is associated with attempted entry into the cell cycle. J

Clin Invest 1998, 101(12): 2842-50.

21. Megyesi J, Safirstein RL, Price PM. Induction of p 21 WAF1?CIP1/SDI1 in

kidney tubule cells affects the course of cisplatin-induced acute renal

failure. J Clin Invest 1998, 101(4): 777-82.

22. Otto AM, Paddenberg R, Schubert S, Mannherz HG. Cell cycle arrest,

micronucleus formation, and cell death in growth inhibition of MCF-7 breast

cancer cells by tamoxifen and cisplatin. J Cancer Res Clin Oncol 1996,

122(10): 603-612.

23. Boersma AW, Nooter K, Oostrum RG, Stoter G. Quantification of apoptotic

cells with fluorescein isothiocyanate-labeled annexin V in chinese hamster

ovary cells cultures treated with cisplatin. Cytometry 1996, 24(2): 123-130.

24. Ormerod MG, O`Neill C, Robertson D, Helland LR, Harrap KR. Cis-

diamminedichloroplatinum (II)-induced cell death through apoptosis in

sensitive and resistant human ovarian carcinoma cell lines. Cancer Chemother

Pharmacol 1996, 37(5): 463-471.

25. Uslu R, Jewett A, Bonavida B. Sensitization of human ovarian tumor cells

by subtoxic CDDP to anti-fas antibody mediated cytotoxicity and apoptosis.

Gynecol Oncol 1996, 62(2): 282-91.

26. Fulda S, Sieverts H, Friesen C, Herr I, Debatin KM. The CD95(APO-1/Fas)

system mediates drug-induced apoptosis in neuroblastoma cells. Cancer Res

1997, 57(17): 3823-9.

27. McGahon AJ, Costa Pereira AP, Daly L, Cotter TG. Chemotherapeutic drug-

induced apoptosis in human leukaemic cells is independent of the Fas(APO-

1/CD95) receptor/ligand system. Br J Haematol 1998, 101(3): 539-47.

28. Antoku K, Liu Z, Johnson DE. Inhibition of caspase proteases by CrmA

enhances the resistance of human leukemia cells to multiple chemotherapeutic

agents. Leukemia 1997, 11(10): 1665-72.

29. Chen Z, Naito M, Mashima T, Tsuruo T. Activation of actin-cleavable

interleukin 1 beta-converting enzyme (ICE) family protease CPP-32 during

chemotherapeutic agent-induced apoptosis in ovarian carcinoma cells. Cancer

Res 1996, 56(22): 5224-9.

30. Marissen WE, Lloyd RE. Eukariotic translation initiation factor 4G is

targeted for proteolytic cleavage by caspase 3 during inhibition of

translation in apoptotic cells. Mol Cell Biol 1998, 18(12): 7565-74.

31. Kraker AJ, Moore CW. Accumulation of cis-diamminedichloroplatinum (II) and

platinum analogues by platinum-resistant murine leukemia cells in vitro

. Cancer Res 1988; 48: 9-13.

32. Eichholtz-Wirth H, Hietel B. The relationship between cisplatin sensitivity

Страницы: 1, 2, 3, 4