|
|Этанол 40% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |
|Этанол 70% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |
|ХЛФ |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |
|Эфир |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |
По данным таблицы 5 можно сделать вывод, что хвощ лесной обладает самой
низкой антигрибковой активностью. Активность проявляется у водного
извлечения относительно Candida albicans.
Примечание: В условиях нашего опыта за максимальную концентрацию
бралось 1000 мкг/мл, так как согласно литературным данным более высокие
количества не представляют интереса в плане практического использования
растений.
Как видно из данных таблиц, все пять видов исследованного сырья
проявили фунгистатическую активность, но в разной степени. Наибольшую
активность проявил экстракт хвоща полевого. Он оказался активным в
отношении всех пяти использованных тест-культур. Экстракты хвощей
болотного, зимующего и лугового оказались активными только в отнашении Tr.
rubrum, а экстракт хвоща лесного активен в отнашении Asp. niger.
Фунгистатическая активность меняется в зависимости от выбора
экстрагента. Из таблиц видно, что оптимальным экстрагентом является вода
горячая.
Глава IV Изучение химического состава рода хвощ
1 Качественный состав.
1 Обнаружение алкалоидов
Проводили спомощью общеосадительных реактивов. Результаты представлены
в таблицах 7 и 8.
По таблице 7 видно, что все виды исследуемых хвощей проявили одинаковую
чувствительность к реактиву Фреде, по отношению к реактиву Драгендорфа
наиболее чувствительными оказались хвощ лесной и хвощ зимующий, с реактивом
Вагнера наиболее заметный результат получился в отношении хвоща лугового.
Таблица 7
| |р. Фреде |р. Драген-фа |р. Вагнера |
|Хв. полевой |+ + |+ |+ |
|Хв. луговой |+ + |+ |+ + |
|Хв. лесной |+ + |+ + |- |
|Хв. болотный |+ + |+ |+ |
|Хв. зимующий |+ + |+ + |+ |
Из таблицы 8 видно, что наилучший результат с 1% р-ром фосфорно-
вольфрамовой кислоты показали хвощи: луговой, полевой и болотный, с
раствором фосфорно-молибденовой кислоты - хвош лесной и хвощ зимующий, с
раствором кремниево-вольфрамовой кислоты- полевой, луговой и лесной, с
раствором пикриновой кислоты результаты реакций были менее значительны .
1%-е растворы кислот
Таблица 8
| |ф-вольфр. |ф-молибд. |кр.-вольфр |пикринов. |
| |к-та |к-та |к-та |к-та |
|Хв. полевой |+ + + |+ + |+ + |- |
|Хв. луговой |+ + + |+ + |+ + |+ |
|Хв. лесной |+ |+ + + |+ + |+ |
|Хв. болотный |+ + + |+ + |+ |- |
|Хв. зимующий |+ |+ + + |+ |- |
Примечание: (-)- отсутствие помутнения, осадка;
(+)- слабая опалесценция;
(+ +)- хорошо заметное помутнение;
(+ + +)- наличие осадка.
Исходя из полученных результатов взаимодействия кислого извлечения из
травы хвоща полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного с
общеосадительными реактивами на алкалоиды делаем вывод, что данная группа
веществ присутствует в исследуемых объектах.
2 Идентификация флавоноидов.
Проба Синода .
При нагревании смеси спиртового извлечения травы хвоща полевого с
соляной кислотой и цинком появлялось розовое окрашивание. Такое же
окрашивание наблюдалось и в случае хвоща лесного, что говорит о наличии
данной группы веществ в исследуемых объектах. В случае остальных объектов
(хвощей болотного, лугового, зимующего), видимых изменений окраски не
происходило, возможно что в этих объектах флавоноиды находятся в меньшем
количестве и необходимы более чувствительные методы для их идентификации.
3 Определение дубильных веществ.
При взаимодействии водных извлечений всех пяти видов исследуемых хвощей
с железоаммонийными квасцами образовалось черно-зеленое окрашивание, а в
случае хвоща полевого и лесного так же выделился осадок черно-зеленого
цвета, что указывает на присутствие группы конденсированных дубильных
веществ. Этот результат подтверждается реакцией взаимодействия извлечений с
10% уксусной кислотой и 10% солью ацетата свинца (образовывалось черно-
зеленое окрашивание).
4 Обнаружение сапонинов.
Проводили реакцию пенообразования водных извлечений исследуемых
объектов с гидроксидом натрия и с соляной кислотой, после встряхивания
образовывалась устойчивая пена во всех случаях, что свидетельствует о
наличии сапонинов тритерпеновой природы.
5 Обнаружение алифатических кислот.
Исследование алифатических кислот проводилось и ранее, но нам представилось
интересным проверить наличие таких кислот как щавелевая, янтарная, яблочная
и винная и подтвердить наличие уже известной лимонной кислоты.
Исследовалось только водное извлечение хвоща полевого.
Результаты представлены в таблице 9.
Таблица 9
|Проведенная реакция |Результат |
|1.реакция на щавелевую|Осадка не образовалось |
|кислоту | |
|2.р-ция на янтарную |Зеленая флуоресценция не появилась |
|кислоту | |
|3.р-ция на лимонную |при нагревании появилось фиолетовое |
|кислоту |окрашивание |
|4.р-ция на яблочную |при нанесении на хроматогр. бумагу |
|кислоту |крайняя зона после разделения |
| |флуоресцирует желто-зеленым цветом |
|5.р-ция на винную |образуется малиновое окрашивание, |
|кислоту |переходящее при нагревании в вишневое |
Результаты таблицы свидетельствуют о наличии в траве хвоща полевого
лимонной, яблочной и винной кислот.
6 Определение полисахаридного комплекса.
Для разделения полисахаридного комплекса использовали метод восходящей
бумажной хроматографии в системе ацетон:бутанол:вода с использованием
сахаров-свидетелей. После обработки хроматограммы анилинфитолатом и
нагревания в сушильном шкафу при t( 105(С обнаружились пятна с Rf=0.27 и
Rf=0.24, что соответствует ксилозе и арабинозе.
7 Определение минерального состава.
В результате проведения рентгено-флуоресцентного анализа на
спектрометре «Спектроскан» сухих остатков хвощей полевого, лугового,
лесного, зимующего и болотного были обнаружены следующие тяжелые металлы:
свинец, цинк, никель, медь, кобальт, железо, марганец, хром.
8 Сесквитерпеновые лактоны
ИК спектры полученной «смолки» в пленке давали полосы поглощения 1750см-
1, что свидетельствует о (-лактонной природе выделенной суммы веществ.
9 Соединения кремния
Реакция образования желтого и синего кремнемолибденового комплекса с
молибдатом аммония в кислой среде с использованием в качестве
восстановителя аскорбиновой кислоты, подтвердила наличие во всех
исследуемых видах соединений кремния.
2 Количественное определение.
1 Определение содержания флавоноидов
Для изучения содержания флавоноидов использовали методику
хроматоспектрофотометрического определения. Исследование показало,что
наибольшее количество флавоноидов содержится в хвощах полевом и болотном, в
остальных исследуемых образцах количество флавоноидов несколько ниже.
Результаты представлены в таблице 10
Таблица 10
|хвощ полевой|хвощ лесной |хвощ |хвощ луговой|хвощ |
| | |зимующий | |болотный |
|3,37% |1,09% |2,83% |3,2% |3,78% |
2 Определение содержания кремния
Определение проводили используя метод фотоколориметрии , результаты
исследования показали, что содержание соединений кремния в траве хвоща
полевого составило 1,11%, в траве хвоща лесного- 1,12%, в траве хвоща
зимующего 2,12%, в траве лугового и болотного соответственно 1,67% и 2,08%.
4.2.3 Изучение содержания экстрактивных веществ в траве хвоща полевого.
Определение содержания экстрактивных веществ проводили параллельно с
исследованием по выбору экстрагента и времени экстрагирования. Результаты
исследования представлены в таблицах.
Из представленных данных в таблице 11 видно, что максимальное
количество экстрактивных веществ в траве хвоща полевого извлекается водой
очищенной, как холодной так и горячей.
Содержание экстрактивных веществ в траве хвоща полевого в зависимости
от экстрагента. (1)
Таблица 11
|Экстрагент |Выход, г |% |
|Этанол 40% |5,78 |28,92 |
|Этанол 70% |5,8 |29,0 |
|Этанол 96% |1,8 |9,0 |
|Вода 20(С |6,88 |34,4 |
|Вода 90-100(С |7,31 |36,55 |
|Хлороформ |1,4 |7,0 |
|Ацетон |0,15 |2,14 |
Исследование времени настаивания на выход экстрактивных веществ
показало, что максимальный выход наблюдается после 16-ти часов настаивания
и в последующие часы меняется незначительно и находится в пределах от 34 до
34,45.
Полученные результаты приведены в таблице 12, в качестве экстрагента
использовалась вода горячая.
Влияние времени настаивания на выход экстрактивных веществ хвоща
полевого.
Таблица 12
|№ |Время экст-ции, |Выход, г |Выход, % |
| |час | | |
|1. |12 |5,83 |29,15 |
|2. |14 |6,22 |31,1 |
|3. |16 |6,86 |34,3 |
|4. |18 |6,8 |34 |
|5. |20 |6,89 |34,45 |
4.2.4 Обнаружение эфирных масел.
Проводили по фармакопейной методике. В результате проведенного
исследования эфирное масло не было обнаружено, поэтому количественное
определение не проводили.
4.2.5 Определение полисахаридного комплекса.
После фильтрования осадков на воронке Бюхнера, фильтры с осадками
высушивали и взвешивали на аналитических весах (перед фильтрованием чистые
фильтры также взвешивались на аналитических весах).Результаты представлены
в таблице 13.
Содержание полисахаридных фракций в траве хвоща полевого.
Таблица 13
|№ |Фракция |Масса фильтра, |Масса фильтра с|Масса осадка, |
| | |г |осадком, г |в г |
| | | | |в % |
|1. |Фр. А |0,2268 |0,4564 |0,2296 |2,1 |
|2. |Фр. Б |0,22537 |0,29861 |0,07324|0,62 |
|3. |Фр. В |0,22076 |0,4009 |0,18014|1,35 |
|Масса общая | |0,48298|4,07 |
По результатам таблицы 12 следует, что содержание комплекса
полисахаридов в траве хвоща полевого составляет около 4,07%. Значительную
часть из этого комплекса занимают водорастворимые полисахариды, которые
составляют 2,1% (фр.А), чуть меньше содержится полисахаридов гемицеллюлезы
и составляет 1,35% (фр. В), пектиновые вещества составляют лишь 0,62%.
5 Содержание микроэлементов.
Результаты таблицы 14 показывают, что в траве хвоща полевого больше
всего содержится железа и марганца, в траве хвоща болотного, лугового и
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6
|
